GB/T 38483-2020.Determination of antibacterial activity for microbial secondary metabolites-Inhibition zone method.

1范围

GB/T 38483规定了用抑菌圈法测定微生物源抗生素类次生代谢产物抗细菌活性的方法。

GB/T 38483适用于微生物源抗生素类次生代谢产物抗细菌活性测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

GB 19489实验室 生物安全要求

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

抑制中浓度 median inhibitory concentration

IC50

对细菌的抑制率达到50%时的浓度。

3.2

抗细菌活性 antibacterial activity

抑制细菌生长繁殖的能力。

3.3

抑菌圈 inhibition zone

固体培养基表面与试样接触的边界处无菌繁殖的环带区域。

4原理

利用待测次生代谢产物在琼脂平板中扩散使其周围的细菌生长受到抑制形成的抑菌圈大小,计算IC50来判定活性。

5实验室生物安全要求

应符合GB 19489的规定。

6试剂或材料

除非另有规定,所用试剂均为分析纯。

6.1 水。GB/T 6682 一级水。

6.2 LB液体培养基。称取胰蛋白胨10.0 g、酵母提取物5.0 g.氯化钠10.0 g,然后将上述各成分加于1 000 mL蒸馏水中,煮沸溶解,调节pH至7.0士0.2,分装至锥形瓶中,121 ℃灭菌20 min。

6.3 LB固体培养基。称取胰蛋白胨10.0 g.酵母提取物5.0 g、氯化钠10.0 g、琼脂20.0 g,然后将上述各成分加于1000 mL蒸馏水中,煮沸溶解,调节pH至7.0士0.2,分装至250 mL锥形瓶中,121 °C灭菌20 min。

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