GB/T 38740-2020.Laboratory animal-Method for examination of simian Marburg virus (MARV).

1范围

GB/T 38740规定了猴马尔堡病毒实时荧光RT-PCR检测的操作方法。

GB/T 38740适用于猴马尔堡病毒的检测。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 18088出入境动物检疫采样

GB 19489实验室生物安 全通用要求

3术语和定 义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

马尔堡病毒 Marburg virus

一种高致病性病毒,属丝状病毒科(Filoviridae),单股负链RNA病毒,基因组约19.1kb,为已知的最大的负链RNA病毒。

3.2

逆转录实时荧光聚合酶链式反应 real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction; real-time RT-PCR

将mRNA逆转录为cDNA后再作为模板进行实时荧光PCR扩增。PCR反应体系中加入一对引物的同时加入一条特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸片段,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR特异性扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

3.3

噪音 noise

荧光PCR仪在仅仅使用PCR管和水的状态下的本底荧光强度。

3.4

Ct值 cycle threshold value

从基线到指数增长的拐点所对应的PCR反应循环次数。