100批次/年基因治疗药物研发实验项目主要原材料及物料平衡
[环境影响评价报告 - 资料分享]
发表于：2025-07-23 16:02:58
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前言
本文概述了基因治疗药物研发项目的主要原材料、辅料及详细的物料平衡表，为项目环保评估提供了关键数据支持。
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1. 主要原材料及辅料
项目主要原辅材料见表1。
| 材料名称 | 单位 | 年使用量 | 使用工序及用途 |
|---|---|---|---|
| 酵母粉 | 500g/瓶 | 3瓶 | 质粒转化 |
| 氯化钠 | 500g/瓶AR级 | 2瓶 | 质粒转化、细胞裂解 |
| 琼脂粉 | 500g/瓶 | 2瓶 | 质粒转化 |
| 氯化钾 | 500g/瓶 | 1瓶 | 质粒制备 |
| 丙三醇(甘油) | 500ml瓶 | 2瓶 | 质粒制备 |
| 质粒提取试剂盒 | 250次/盒 | 20盒 | 质粒提取 |
| 无内毒素质粒大量提取试剂盒 | 25次/盒 | 20盒 | 试剂盒抽提 |
| 卡那霉素 | 5g/瓶 | 5瓶 | 质粒转化、种子培养 |
| 氨苄青霉素 | 5g/瓶 | 5瓶 | 质粒转化、种子培养 |
| 限制性内切酶(PspXI、PstIHF、Sacll、SallHF等) | 500ul/支 | 20支 | 质粒转化 |
| 蛋白胨 | 500g/瓶 | 3瓶 | 质粒转化 |
| T4DNA连接酶 | 500ul/支 | 4支 | 分子克隆 |
| Taq DNA聚合酶 | 500ul/支 | 10支 | 分子克隆 |
| Trans15k DNAMarker(DNA分子标记) | 500ul/支 | 20支 | 分子克隆 |
| HEK293细胞 | 1ml/支 | 30支 | 病毒扩增、表达检测 |
| 胰酶替代物 | 100ml/瓶 | 10瓶 | 细胞扩增 |
| 胎牛血清 | 500ml/瓶 | 10瓶 | 细胞复苏、细胞扩增 |
| DMEM培养基 | 500ml/瓶 | 50瓶 | 细胞复苏、细胞扩增、细胞转染 |
| PBS缓冲液(不含钙，镁) | 500ml/瓶 | 20瓶 | 细胞扩增、细胞裂解、LFDF过滤 |
| 谷氨酰胺替代物 | 100ml/瓶 | 10瓶 | 细胞复苏、细胞扩增、细胞转染 |
| 抗生素Penicillin Streptomycin-Glutamine100ml/瓶 | 5瓶 | 细胞扩增 | |
| Liquid PElpro(转染试剂)10ml/瓶 | 10瓶 | 细胞转染 | |
| TritanX400 | 100ml 瓶 | 5瓶 | 细胞裂解 |
| 六水合氯化镁 | 500g/瓶 | 1瓶 | 细胞裂解 |
| Benzonase 核酸酶 | 100μl/支 | 5支 | 细胞裂解 |
| 一水合柠檬酸 | 500g/瓶 | 1瓶 | 层析、纯化 |
| 磷酸 | 500g/瓶 | 1瓶 | 层析、纯化 |
| 盐酸 | 500ml/瓶 | 1瓶 | 层析、纯化、切片染色分化 |
| 氢氧化钠 | 500g/瓶 | 1瓶 | 层析、纯化 |
| 三羟甲基氨基甲烷 | 500g/瓶 | 1瓶 | 层析、纯化 |
| F68(泊洛沙姆) | 500ml/瓶 | 1瓶 | UF DF 过滤 |
| 碘克沙醇 | 500ml/瓶 | 5瓶 | 超速离心 |
| SuperRed/GelRed(核酸染料) | 100ul/支 | 20支 | 电泳检测 |
| 大肠杆菌NEB Stbl3 | 20支/盒 | 3盒 | 病毒蛋白纯度(SDSPAGE.银染)检测 |
| 10%SDS | 100ml/瓶 | 1瓶 | 病毒基因组滴度PCR 检测 |
| 0.5M EDTA | 100ml/瓶 | 1瓶 | 病毒基因组滴度PCR 检测 |
| 蛋白酶K | 5ml/支 | 2支 | 病毒基因组滴度PCR 检测 |
| Easy Diludian 包 | 20包 | 病毒基因组滴度PCR 检测 | |
| TB Green Premix Ex Taq l 包 | 10包 | 病毒基因组滴度PCR 检测 | |
| 引物 | 10D/支 | 30支 | 病毒基因组滴度PCR 检测 |
| SDS | 500g/瓶 | 4瓶 | PCR 检测 |
| AAV2Titration ELISA(ELISA 检测试剂盒) | 96孔(12*8) | 2盒 | ELISA 检测 |
| HCP ElisaKit(ELISA 检测试剂盒) | 96孔板/盒 | 2盒 | ELISA 检测 |
| TMB 显色液 | 10ml/瓶 | 20瓶 | ELISA 检测 |
| 终止液 | 10ml/瓶 | 20瓶 | ELISA 检测 |
| 胰胳大豆胨琼脂培养基(TSA) | 10个/包 | 4包 | 无菌检测 |
| 胰酪大豆胨液体培养基管(TSB) | 20支/盒 | 4盒 | 无菌检测 |
| 硫乙酸盐流体培养基管(FTM) | 20支/盒 | 4盒 | 无菌检测 |
| 鲎试剂(凝胶法)—0.1ml(灵敏度0.5EU) | 10支/盒 | 4盒 | 内毒素检测 |
| 细菌内毒素检查用水(5ml/支) | 10支/盒 | 4盒 | 内毒素检测 |
| 细菌内毒素工作标准品 | 10EU/支 | 15支 | 内毒素检测 |
| 预染蛋白marker(10480kDa) | 250μl/支 | 10支 | WB 检测 |
| 脱脂奶粉 | 500g/瓶 | 3瓶 | WB 检测 |
| 吐温20(Tween 20) | 100ml/瓶分析纯 | 2瓶 | WB 检测、免疫荧光染色 |
| 甘氨酸 | 2.5kg/瓶AR | 3瓶 | WB 检测 |
| 丙烯酰胺甲叉29:1.30%溶液 | 500ml/瓶 | 2瓶 | WB 检测 |
| SDSPAGE 蛋白上样缓冲液(5X) | 1ml/支 | 20支 | WB 检测 |
| RIPA 裂解液(中) | 200mL/瓶 | 3瓶 | WB 检测 |
| RIPA 裂解液(弱) | 200mL/瓶 | 3瓶 | WB 检测 |
| ECL 显色液 | 50ml/支 | 3支 | WB 检测 |
| 1.5M Tris+HCI 溶液，pH8.8 | 500ml/瓶 | 2瓶 | WB 检测 |
| 1.0M TrisHCl 溶液，pH6.8 | 500ml/瓶 | 2瓶 | WB 检测 |
| 胎牛血清白蛋白BOVINE SERUM ALBUMIN | 10g/瓶 | 3瓶 | WB 检测 |
| 10×TBS | 500ml/瓶 | 10瓶 | WB 检测 |
| Trisglycine 转膜缓冲液(10×液体) | 500ml/瓶 | 10瓶 | WB 检测 |
| BCA 蛋白浓度测定试剂盒(增强型) | 5000次/包 | 5包 | WB 检测 |
| 异丙醇 | 500ml/瓶 | 20瓶 | WB 检测、质粒提取、组织样本脱水、切片染色 |
| 无水乙醇 | 500ml/瓶 | 560瓶 | WB 检测、质粒提取、组织样本脱水、切片染色 |
| 甲醇 | 500ml/瓶 | 40瓶 | WB 检测 |
| 总RNA 提取试剂盒 | 50次/盒 | 10盒 | OPCR 检测 |
| DNA 提取试剂盒 | 50次/盒 | 2盒 | QPCR 检测 |
| TB Green Premix Ex Taqll(2×)(Tli RNaseH Plus),ROX plus(荧光染料PCR 试剂盒) | 5支/包 | 10包 | OPCR 检测 |
| TritanX-400 | 50ml/支 | 1支 | 免疫荧光染色 |
| 免疫染色封闭液(TritonX400、BSA) | 100ml/瓶 | 5瓶 | 免疫荧光染色 |
| DAPI 染色液 | 50ml/支 | 5支 | 免疫荧光染色 |
| 鞘液(成分：氯化钠、氯化钾、乙二胺四乙酸 二钠和抑菌剂) | 5L/桶 | 4桶 | 流式细胞检测 |
| 清洗液(主要成分磷酸盐、水、防腐剂) | 5L/桶 | 4桶 | 流式细胞检测 |
| 深度清洗液(主要成分十二烷基硫酸钠) | 5L/桶 | 4桶 | 流式细胞检测 |
| 生理盐水 | 250ml/瓶 | 100瓶 | 组织样本清洗 |
| T5Direct PCR Kit(Animal Tissue)(鼠尾PCR试剂盒) | 1.0ml/支 | 20支 | 动物样本PCR 检测 |
| FAS 眼球固定液 | 100ml/瓶 | 24瓶 | 动物样本固定 |
| 二甲苯 | 500ml/瓶 | 120瓶 | 动物样本透明、脱蜡 |
| 鳞片状切片石蜡 | 1kg/袋 | 4袋 | 动物样本包埋 |
| 冷冻切片OCT 包埋剂 | 118ml/瓶 | 10瓶 | 动物样本包埋 |
| 蔗糖 | 500g/瓶 | 1瓶 | 动物样本脱水 |
| 甲苯胺蓝染液 | 5g/瓶 | 1瓶 | 动物组织切片染色 |
| 冰醋酸 | 500ml/瓶 | 1瓶 | 动物组织切片染色 |
| 返蓝液(稀碳酸锂溶液) | 1L/瓶 | 1瓶 | 动物组织切片染色 |
| 伊红染液 | 1L 瓶 | 1瓶 | 动物组织切片染色 |
| 苏木素染液 | 500ml/瓶 | 1瓶 | 动物组织切片染色 |
| 番红固绿染色试剂盒 | 2×50ml | 1盒 | 动物组织切片染色 |
| 阿利新蓝染色试剂盒 | 3×50ml | 2盒 | 动物组织切片染色 |
| 封片胶 | 100ml/瓶 | 2瓶 | 动物组织切片染色 |
| 100X 柠檬酸钠抗原修复液 | 250ml/瓶 | 1瓶 | 动物组织切片染色 |
| 10XPBS 缓冲液 | 500ml/瓶 | 3瓶 | 组织清洗，免疫荧光染色、ELISA |
2. 物料平衡表
（1）研发过程物料平衡分析
| 序号 | 进料 | 出料 | 备注 |
|---|---|---|---|
| 1 | 超纯水 | 500 | 进入废气 |
| 2 | 乙醇 | 220 | 进入废水极少量主要为仪器清洗废水 |
| 3 | 甲醇 | 15.8 | 进入固废 948.7 含实验成品 |
| 4 | 二甲苯 | 51.95 | |
| 5 | 胎牛血清 | 56 | |
| 6 | DMEM 培养基 | 257 | |
| 7 | 缓冲液 | 26.58 | |
| 8 | 磷酸 | 0.99 | |
| 9 | 盐酸 | 0.6 | |
| 10 | 氢氧化钠 | 0.5 | |
| 11 | 异丙醇 | 7.9 | 进入固废 |
| 12 | 蛋白胨 | 1.5 | |
| 13 | 生理盐水 | 33.3 | |
| 14 | 清洗液 | 40 | |
| 15 | 鞘液 | 20 | |
| 16 | 甘氨酸 | 7.5 | |
| 17 | 丙三醇 | 1.3 | |
| 18 | 其它小量试剂 | 合计 约50 | |
| 19 | 合计 | 1007.7 | 合计 1007.7 |
（2）挥发性有机物平衡分析
| 序号 | 进料 | 出料 | 备注 |
|---|---|---|---|
| 1 | 乙醇 | 220 | 进入废气 |
| 2 | 甲醇 | 15.8 | 进入废水极少量 主要为仪器清洗废水 |
| 3 | 异丙醇 | 7.9 | 进入固废 |
| 4 | 丙三醇 | 1.3 | |
| 5 | 二甲苯 | 51.9 | |
| 6 | 合计 | 296.9 | 合计 296.9 |
（3）氯化氢平衡
| 序号 | 进料 | 出料 | 备注 |
|---|---|---|---|
| 1 | 原料带甲醇 | 15.8 | 进入废气 3.22进入废水极少量主要为仪器清洗废水 |
| 2 | 进入固废 | 12.6 | |
| 3 | 合计 | 15.8 | 合计 15.8 |
（4）二甲苯平衡
| 序号 | 进料 | 出料 | 备注 |
|---|---|---|---|
| 1 | 原料带二甲苯 | 51.9 | 进入废气10.42进入废水极少量 主要为仪器清洗废水 |
| 2 | 进入固废 | 41.5 | |
| 3 | 合计 | 51.9 | 合计 51.9 |
（5）磷平衡
| 序号 | 进料 | 出料 | 备注 |
|---|---|---|---|
| 1 | 原料带磷 | 1.16 | 进入废气/ |
| 2 | 进入废水极少量 | ||
| 3 | 进入固废 | 1.16 | |
| 4 | 合计 | 1.16 | 合计 1.16 |
